标签:
体的放射性配体结合分析(Radioligand binding assay of receptors, RBA),具有体外超微量
分析的特点。它用放射性核素(常用I-125, H-3)标记配体与相应的受体、转运体、酶进行特异结合,测定复合物的放射性活度,研究配体与受体的反应性质(解离常数:Kd)和受体的数量(Bmax),从而对受体进行定性和定量研究,包括研究受体亚型的分类等。RBA可应用于神经递质、激素的作用机理研究。近年来在药物研究应用中日益增多,可用来筛选、发现新药。 如果固定放射性配体和受体的数目,而加入另外一种非标记配体放射性配体发生竞争反应,就可以测定该非标记配体相对该放射性配体和受体的半抑制常数(IC50)。进一步通过Cheng-Prusoff方程计算出该非标记配体与受体的抑制常数(Ki),这种方法称为放射性配体竞争结合实验(Competitive binding assay),是受体放射配基结合分析技术的一种。 Cheng-Prusoff方程: Ki = IC50 / (1+ [L] / Kd) IC50表示非标记配体与受体的半抑制常数; [L] 表示放射性标记配体的浓度; Kd 表示放射性标记配体与受体的解离常数 放射性配体竞争结合实验示意图 本实验将采用之前实验制备的[125I] IMPY作为放射性标记配体,通过单位点竞争结合实验的方法测定化合物与淀粉样蛋白聚集体的亲和力常数
标签:
原文地址:http://www.cnblogs.com/yeyusubei/p/5803486.html